Dithiothreitol (DTT) bụ ihe a na-ejikarị ebelata ihe, nke a makwaara dị ka ihe mgbakwunye akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ ọhụrụ. Ọ bụ obere ihe mejupụtara ihe ndị dị ndụ nke nwere otu mercaptan abụọ (-SH). N'ihi mbelata na nkwụsi ike ya, a na-eji DTT eme ihe nke ukwuu na nnwale biochemistry na molekul bayọlọji.
Isi ọrụ nke DTT bụ ibelata njikọ disulfide na protein na biomolecules ndị ọzọ. Njikọ disulfide bụ akụkụ dị mkpa nke mpịachi protein na nkwụsi ike, mana n'okpuru ụfọdụ ọnọdụ nnwale, dịka nyocha SDS-PAGE nke a na-ebelata, njikọta protein na mpịachi, ọ dị mkpa ibelata njikọ disulfide na otu thiol abụọ iji kewaa nhazi oghere nke protein ahụ. DTT nwere ike imeghachi omume na njikọ disulfide iji belata ha na otu mercaptan, si otú a na-emepe nhazi oghere nke protein ahụ ma mee ka ọ dị mfe inyocha na ịchịkwa.
A pụkwara iji DTT chebe ọrụ na nkwụsi ike nke enzyme. N'ụfọdụ mmeghachi omume nke enzyme na-eme ka a na-agbanwe agbanwe, oxidant nwere ike ibelata ọrụ nke enzyme ahụ. DTT nwere ike imeghachi omume na oxidants iji belata ha ka ha bụrụ ihe na-adịghị emerụ ahụ, si otú a na-echebe ọrụ na nkwụsi ike nke enzyme ahụ.
Ma e jiri ya tụnyere ọgwụ ndị e ji ebelata ihe dịka β-mercaptoethanol (β-ME), a na-ewere DTT dị ka ihe na-ebelata ihe ndị dị ize ndụ ma kwụsie ike. Ọ bụghị naanị na ọ na-adịgide adịgide n'ime mmiri mmiri, kamakwa ọ na-ejigide ihe ndị na-ebelata ihe ndị dị na ya n'okpuru oke okpomọkụ na ọnọdụ acid.
Ojiji nke DTT dị mfe. N'ozuzu, a na-agbaze DTT n'ime ihe nchekwa kwesịrị ekwesị wee tinye ya na sistemụ nnwale. A ghaghị ikpebi oke ntinye nke DTT dịka nnwale ahụ si dị, a na-ejikarị ya eme ihe n'etiti 0.1-1mM. Oke ntinye nwere ike ibelata mmetụta ọjọọ na uto mkpụrụ ndụ ma nwee ike ibelata nsí nsí n'ihi oke mmepụta nke protein ndị a na-elekwasị anya. Oke ntinye nwere ike ibute oke ibu nke metabolism mkpụrụ ndụ, na-emetụta uto mkpụrụ ndụ na arụmọrụ ngosipụta.
Ụzọ isi chọpụta njupụta kachasị mma nwere ike ịbụ inyocha ọkwa njupụta nke protein ebumnuche site n'ime ule ntọlite IPTG na njupụta dị iche iche. Enwere ike ime nnwale ọdịbendị obere site na iji ọtụtụ njupụta IPTG (dịka ọmụmaatụ 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, wdg) na enwere ike inyocha mmetụta njupụta dị iche iche site na ịchọpụta ọkwa njupụta nke protein ebumnuche (dịka ọmụmaatụ Western blot ma ọ bụ nchọpụta fluorescence). Dịka nsonaazụ nnwale si dị, ahọpụtara njupụta nwere mmetụta njupụta kacha mma dị ka njupụta kacha mma.
Tinyere nke ahụ, ị nwekwara ike ileba anya na akwụkwọ ndị dị mkpa ma ọ bụ ahụmịhe nke ụlọ nyocha ndị ọzọ iji ghọta oke ntinye IPTG a na-ejikarị eme ihe n'okpuru ọnọdụ nnwale ndị yiri ya, wee melite ma gbanwee dịka mkpa nnwale si dị.
Ọ dị mkpa ịmara na ntinye kachasị mma nwere ike ịdị iche dabere na sistemụ ngosipụta dị iche iche, protein ndị a na-elekwasị anya, na ọnọdụ nnwale, yabụ ọ kacha mma ime ka ọ dịkwuo mma n'otu n'otu.
Na nchịkọta, DTT bụ ihe a na-ejikarị ebelata ihe nke enwere ike iji belata njikọ disulfide na protein na biomolecules ndị ọzọ ma chebe ọrụ na nkwụsi ike nke enzyme. A na-ejikarị ya eme ihe n'ọtụtụ ebe na nnwale biochemistry na molekul bayọlọji.
Oge ozi: Sep-28-2023